检测生物组织中的糖类脂肪蛋白质教案(检测生物组织中的糖类脂肪蛋白质)
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1、糖类中还原糖(例葡萄糖、果糖、麦芽糖等)可用斐林试剂检测。
2、先准备组织样液,再准备0·1g/ml的氢氧化钠溶液、0.05g/ml硫酸铜溶液。
3、方法步骤:1.(1)取2ml组织样液加入1支洁净的试管。
4、 (2)再另取2支试管,分别加入2mlNaOH与硫酸铜溶液,再把硫酸铜溶液倒入氢氧化钠溶液的试管,振荡混合均匀,即为斐林试剂。
5、 (3)把新配制的斐林试剂与组织样液,等体积混合,振荡摇匀,然后放入50~60度水浴中保温,观察颜色变化。
6、如出现砖红色沉淀,即说明有还原糖。
7、 非还原糖(淀粉用碘液检测即可)碘遇淀粉变蓝。
8、 脂肪用苏丹三或苏丹四检测,材料可用浸泡过"的花生种子,先制成临时装片,再用显微镜观察。
9、或者把试剂滴加到组织样液中,观察颜色变化。
10、 临时装片制作:用刀片先在花子叶切开,然后做徒手切片,放在清水中,然后用毛笔蘸取最薄的一片放在载玻片中央,滴加苏丹三溶液染色3到5分钟,用吸水纸吸取多余染液,再用体积分数为50%酒精洗去浮色,盖上盖玻片。
11、放在显微镜下观察。
12、脂肪粒被苏丹三染成橘黄色、苏丹四染成红色。
13、(上述徒手切片做不好,可在花生子叶上 刮取少量粉末,直接涂在载玻片上来替代。
14、 蛋白质用双缩脲试剂来检测。
15、双缩脲是由A液(0.1g/ml的氢氧化钠)、B液(O.01g/mL的硫酸铜溶液组成。
16、) 使用时取组织样液(用蛋清稀释液或豆浆)一2mL加入洁净试管,然后先滴加1mLA液,振荡试管摇匀,再滴加3~4滴硫酸铜溶液,摇匀。
17、蛋白质遇双缩脲生成紫色。
本文到此讲解完毕了,希望对大家有帮助。
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