导读 大家好,我是小曜,我来为大家解答以上问题。质粒dna的提取实验各试剂的作用,质粒dna的提取很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!可以...
大家好,我是小曜,我来为大家解答以上问题。质粒dna的提取实验各试剂的作用,质粒dna的提取很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
可以通过紫外吸收检测。
因为核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml,单链寡核苷酸的含量为30μg/ml,可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm得OD值的比值,估计核酸的纯度。
纯净DNA的比值为1.8, RNA为2.0。若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除尽,若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低。
270nm存在高吸收表明有酚的干扰。 紫外分光光度法只能用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液,对浓度更小的样品,可采用荧光分光光度法。
扩展资料:
在判断过程中,也有可能出现质粒DNA提取纯度失败的情况,具体可能是有以下几个原因:
1、菌体量可能过大,裂解不充分,或裂解液与中和液比例不适当;
2、混合时过于剧烈,可能会带来基因组DNA片段的污染;
3、Rnase失活,可能带来RNA污染;
4、离心不充分(有絮状物在上层),或在离心后吸取上清时,将沉淀吸入,会带来蛋白质污染.
参考资料来源:百度百科——质粒DNA纯化
本文到此讲解完毕了,希望对大家有帮助。