导读 大家好,我是小曜,我来为大家解答以上问题。基因表达载体的构建是基因重组吗,基因表达载体的构建很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧...
大家好,我是小曜,我来为大家解答以上问题。基因表达载体的构建是基因重组吗,基因表达载体的构建很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
1、先回答你的问题,转入外源基因的农杆菌不能较载体,它本身是外源基因的受体,携带外源基因的质粒或者噬菌体才是载体。
2、你想问基因表达载体的构建,这个问题太大,而且表达载体多种多样,用处也很多,所以很难一下子概况。我只能大概说一下:
3、原理:将外源基因片段与载体连接(载体通常选用质粒或者噬菌体或其他病毒),将重组的载体转染受体细胞,使之整合入宿主基因组或者在稳定存在于胞质内,是宿主细胞能够表达载体上的外源基因,从而获得新性状或者新产物。
4、大概步骤:
5、1)从基因组或cDNA上克隆得到完整的目的基因(至少包含CDS区),通常在两端加粘性末端或重组位点
6、2)选择合适的表达载体(真核、原核、噬菌体、某些病毒、标记等)
7、3)将克隆得到的目的基因与载体连接
8、4)将重组载体通过某种手段转入受体,即宿主中(化学转染、脂质体、电转、显微操作等)
9、5)筛选阳性的宿主细胞并扩繁
本文到此讲解完毕了,希望对大家有帮助。